Темозоломид Темозоломид и лечение злокачественной глиомы

Содержание

Темозоломид (известный также под торговым названием Темобел, Темодал, Темодекс, Темомид, Темцитал) цитостатический противоопухолевый химиотерапевтический лекарственный препарат алкилирующего типа действия. Производное тетразина.

Содержание

Темозоломид и лечение злокачественной глиомы
Задний план
Механизм действия
Механизмы сопротивления
AGT.
MMR Pathway.
ПАРП.
Снижение устойчивости к темозоломиду
Алкилирующие агенты.
O 6 -BG.
Клинический опыт применения темозоломида при злокачественных глиомах
Первоначальные исследования фазы 1.
Безопасность.
ФармоКинетика.
Педиатрические пациенты.
Противоопухолевое действие.
Клинический опыт фазы 2 и 3
Обоснование.
Первичные опухоли головного мозга.
Злокачественная метастатическая меланома.
Преодоление сопротивления
Темозоломид Сочетание с цисплатином.
Сочетание с BCNU.
Комбинация с IFN-α-2b.
График непрерывного дозирования.
Резюме и выводы

Темозоломид и лечение злокачественной глиомы

Злокачественные глиомы (мультиформная глиобластома и анапластическая астроцитома) встречаются чаще, чем другие типы первичных опухолей ЦНС, их общая частота составляет 5-8 случаев на 100 000 населения. Даже при агрессивном лечении с использованием хирургического вмешательства, лучевой терапии и химиотерапии медиана выживаемости по сообщениям составляет менее 1 года (1) . Темозоломид, новый препарат, показал себя многообещающим при лечении злокачественных глиом и других трудно поддающихся лечению опухолей. Темозоломид представляет собой новый класс пролекарств имидазотетразина второго поколения, которые в физиологических условиях самопроизвольно превращаются в активный алкилирующий агент MTIC. 3 Таким образом, темозоломид не требует метаболизма в печени для активации (2) .

Интерес к темозоломиду как противоопухолевому агенту обусловлен его противоопухолевой активностью широкого спектра в моделях опухолей у мышей (3) . In vitro темозоломид продемонстрировал зависящую от графика противоопухолевую активность в отношении различных злокачественных новообразований, включая глиому, метастатическую меланому и другие трудноизлечимые виды рака (3 , 4 , 5) . В доклинических исследованиях темозоломид продемонстрировал распределение во всех тканях, включая проникновение в ЦНС; относительно низкая токсичность по сравнению с исходным соединением митозоломидом; и противоопухолевая активность против широкого спектра типов опухолей, включая глиому, меланому, мезотелиому, саркому, лимфому, лейкоз и карциному толстой кишки и яичников (3 ,4 , 5 , 6 , 7 , . Его продемонстрированная способность преодолевать гематоэнцефалический барьер представляет особый интерес с точки зрения его активности при опухолях ЦНС (9) .

В клинических исследованиях фазы 1 и 2, проведенных CRC (Лондон, Соединенное Королевство), темозоломид быстро всасывался, проявлял 100% пероральную биодоступность в течение 1-2 часов после приема и продемонстрировал противоопухолевую активность при рецидивирующих глиомах высокой степени злокачественности, меланоме и грибовидный микоз (10 , 11 , 12 , 13) . Результаты этих исследований показали, что когда темозоломид вводится перорально один раз в день в течение 5 дней в течение 4-недельного цикла, он хорошо переносится, вызывая легкую или умеренную токсичность, которая предсказуема и легко управляема. Результаты также подтвердили способность темозоломида проникать в ЦНС и показали, что темозоломид имеет значительный потенциал в лечении глиом и улучшении качества жизни пациентов с глиомой.(12 , 13 , 14) . Дополнительные исследования фазы 1 подтвердили эти результаты и распространили эти наблюдения на педиатрических пациентов (15 , 16) .

Темозоломид оценивался в ряде клинических испытаний фазы 2 и 3 для лечения мультиформной глиобластомы, анапластической астроцитомы и злокачественной метастатической меланомы — злокачественных новообразований, для которых не существует удовлетворительной терапии. На основании результатов этих исследований темозоломид был одобрен в Европейском Союзе для лечения пациентов с мультиформной глиобластомой, у которых наблюдается прогрессирование или рецидив после стандартной терапии. Недавно темозоломид получил ускоренное одобрение FDA для лечения взрослых пациентов с анапластической астроцитомой, у которых возник рецидив после лечения, включающего препарат нитрозомочевины (BCNU или CCNU) и прокарбазин. В настоящее время проводятся исследования по оценке комбинации темозоломида с другими химиотерапевтическими агентами и биохимиотерапией при лечении злокачественной глиомы и метастатической меланомы соответственно. В этой статье рассматривается механизм действия темозоломида как противоопухолевого средства и резюмируются самые последние клинические исследования темозоломида для лечения злокачественных глиом.

Задний план

Темозоломид торговое название темодал.Темозоломид был синтезирован в Астонском университете в начале 1980-х годов как один из серии новых имидазотетразинонов (17) . Эти агенты были структурно уникальными, потому что они содержали три соседних атома азота, которые обладали уникальными физико-химическими свойствами и гораздо большей противоопухолевой активностью, чем ранее синтезированные бициклические триазены, которые содержали только два соседних атома азота (17) . Наиболее мощное противоопухолевое соединение из этого класса соединений, митозоломид, проявило мощную противоопухолевую активность против большой группы опухолей мышей (18) . Митозоломид — это пролекарство, которое спонтанно разлагается до высокореактивного метаболита, перекрестно связывающего ДНК, без какой-либо необходимости в метаболической активации (19 , 20, 21 , 22 , 23) . Хотя клинические исследования митозоломида в фазе 1 выявили некоторую активность против мелкоклеточной карциномы легких и злокачественной меланомы, он также вызывал непредсказуемую и тяжелую тромбоцитопению, что ограничивало его полезность (24) . Эти предварительные результаты помешали дальнейшей клинической разработке митозоломида.

Темозоломид, 3-метилпроизводное митозоломида, был менее токсичен, чем митозоломид, и проявлял сопоставимую противоопухолевую активность против различных опухолей мышей (3) . Дополнительные характеристики, которые оправдывали его дальнейшее развитие для клинической оценки у пациентов с раком, включали широкое тканевое распределение с проникновением в интактный мозг мыши (25) , 100% биодоступность после перорального приема и отсутствие необходимости ферментативного превращения в мощный противоопухолевый метаболит MTIC.

Механизм действия

Метилирование ДНК, по-видимому, является основным механизмом, ответственным за цитотоксичность темозоломида для злокачественных клеток. Спонтанное превращение темозоломида в реактивный метилирующий агент MTIC инициируется действием воды на высоко электроположительное положение C ⁴ темозоломида. Эта деятельность открывает кольцо, высвобождает CO ₂ и генерирует MTIC (рис. 1) . Первоначальное предложение заключалось в том, что этот эффект воды катализируется в непосредственной близости от большой бороздки ДНК (26 , 27) , но подтвердить этот механизм было сложно, и известно, что темозоломид легко превращается в MTIC в свободном растворе в отсутствие ДНК (2) . MTIC разлагается до катиона метилдиазония, который передает метильную группу ДНК и конечному продукту распада, AIC, который выводится через почки (28 , 29) . Катион метилдиазония также может реагировать с РНК, растворимым и клеточным белком (23) . Однако метилирование РНК и метилирование или карбамоилирование белка, по-видимому, не играют какой-либо известной значимой роли в противоопухолевой активности темозоломида. Необходимы дополнительные исследования для выяснения роли этих мишеней в биохимическом механизме действия темозоломида.

Рисунок 1.

Химическая структура темозоломида. Адаптировано с разрешения Стивенса, MFG et al. (3) .

Спонтанное превращение темозоломида в MTIC зависит от pH. Сравнение периода полураспада темозоломида в фосфатном буфере [(pH 7,4) t _1/2 = 1,83 ч; Ссылка 28 , 29 ] со средним периодом полувыведения из плазмы, наблюдаемым у пациентов после внутривенного и перорального введения ( t _1/2 = 1,81 ч; ссылки 10 , 29 ) указывает на то, что превращение темозоломида в MTIC является химически контролируемой реакцией с небольшим количеством ферментативного компонента или без него. Неферментативное превращение темозоломида в MTIC может способствовать его высокой воспроизводимости PK по сравнению с другими алкилирующими агентами, такими как DTIC и прокарбазин, которые должны претерпевать метаболическое превращение в печени и, таким образом, подвержены вариациям скорости превращения у разных пациентов ( 27 , 29) .

Среди повреждений, возникающих в ДНК после обработки клеток темозоломидом, наиболее распространенным является метилирование в положении N ⁷ гуанина с последующим метилированием в положении O ³ аденина и положении O ⁶ гуанина (29) . Хотя и N ⁷ -methylguanine и O ³ -methyladenine аддукты , вероятно , способствовать противоопухолевой активности темозоломида в некоторых , если не во всех чувствительных клеток, их роль является спорным (30 , 31 , 32) . О ⁶-MG-аддукт (который составляет 5% от общего количества аддуктов, образованных темозоломидом; ссылка 29 ), вероятно, играет решающую роль в противоопухолевой активности агента. Это подтверждается корреляцией между чувствительностью линий опухолевых клеток к темозоломиду и активностью белка репарации ДНК O ⁶ -алкилгуанин алкилтрансферазы, который специфически удаляет алкильные группы в положении O ⁶ гуанина. Клеточные линии с низким уровнем AGT чувствительны к цитотоксичности темозоломида, тогда как линии клеток с высоким уровнем этого репаративного белка гораздо более устойчивы к нему (33 , 34 , 35). . Эта корреляция также наблюдалась на моделях ксенотрансплантата глиобластомы человека (4 , 5 , . Предпочтительное алкилирование гуанина и аденина и корреляция чувствительности к препарату со способностью восстанавливать повреждения O ⁶ -алкилгуанином также наблюдались с триазином, DTIC и нитрозомочевинными алкилирующими агентами BCNU и CCNU (35 , 36 , 37).

Цитотоксический механизм темозоломида, по-видимому, связан с неспособностью системы MMR ДНК найти дополнительное основание для метилированного гуанина. Эта система включает образование комплекса белков, которые распознают, связываются и удаляют метилированный гуанин (38 , 39 , 40) . Предлагаемая гипотеза заключается в том, что, когда этот процесс восстановления нацелен на цепь ДНК, противоположную O ⁶ -MG, он не может найти правильного партнера, что приводит к долгоживущим разрывам в ДНК (41) . Эти зазубрины накапливаются и сохраняются в последующем клеточном цикле, где в конечном итоге ингибируют инициацию репликации в дочерних клетках, блокируя клеточный цикл на границе G ₂ -M (41, 42 , 43 , 44) . Как в мышиных (42), так и в человеческих (45) лейкозных клетках чувствительность к темозоломиду коррелирует с повышенной фрагментацией ДНК и апоптотической гибелью клеток. Доклинические исследования свидетельствуют о том, что аддукты ДНК, образованные темозоломидом, и последующее изменение определенных генов и их родственных белковых продуктов могут не только вызывать гибель клеток, но и снижать метастатический потенциал опухолевых клеток за счет изменения иммуногенности опухолевых клеток (46 , 47 , 48) . Также было высказано предположение, что вызванное темозоломидом повреждение ДНК и последующая остановка клеточного цикла могут снизить метастатические свойства некоторых опухолевых клеток (49 , 50 , 51) .

Механизмы сопротивления

AGT.

Двумя основными механизмами устойчивости к темозоломиду и другим алкилирующим агентам являются фермент AGT (52 , 53) и дефицит пути MMR. Из этих двух механизмов AGT играет основную роль в устойчивости к темозоломиду, удаляя алкильные группы из положения O ⁶ гуанина, фактически обращая вспять цитотоксическое повреждение темозоломида (54) . Чувствительность линий опухолевых клеток к темозоломиду и алкилирующим агентам BCNU и DTIC может коррелировать с уровнями AGT (37 , 45 , 55 , 56 , 57 , 58) . Кроме того, опосредованный ретровирусом перенос гена AGT человека в клетки, лишенные эндогенной активности AGT, придает высокий уровень устойчивости к темозоломиду и другим метилирующим и хлорэтилирующим агентам (59) .

MMR Pathway.

Хотя AGT явно играет важную роль в устойчивости клеток к темозоломиду, некоторые клеточные линии, которые экспрессируют низкие уровни AGT, тем не менее, устойчивы, что указывает на то, что могут быть задействованы другие механизмы устойчивости (60 , 61) . Дефицит пути MMR, возникающий в результате мутаций в одном или нескольких из пяти или шести белковых комплексов, распознающих и восстанавливающих ДНК, может сделать клетки толерантными к метилированию и цитотоксическим эффектам темозоломида. Этот дефицит в пути MMR приводит к неспособности распознавать и восстанавливать аддукты O ⁶ -MG, продуцируемые темозоломидом и другими метилирующими агентами (33 , 62 , 63) . Репликация ДНК продолжается после O ⁶-MG без остановки клеточного цикла или апоптоза. Резистентность опухолевых клеток с дефицитом MMR не связана с уровнем AGT и, следовательно, не зависит от ингибиторов AGT.

ПАРП.

Другой возможный механизм устойчивости к темозоломиду — это основной путь эксцизионной репарации. Исследования показали, что обработка опухолевых клеток человека темозоломидом индуцировала повышение активности PARP, который, как полагают, участвует в эксцизионной репарации нуклеотидов (64 , 65) , а ингибирование PARP, как сообщается, усиливает цитотоксичность метилирования. агенты (66 , 67 , 68) . Несколько исследований с ингибиторами PARP и с клеточными линиями, дефицитными по MMR или эксцизионной репарации, показали роль репарации N ⁷ -метилгуанина и O ^3.-метиладенин проявляет устойчивость к противоопухолевой активности темозоломида и других алкилирующих агентов (30 , 33 , 66 , 67) . Однако важность этих аддуктов в противоопухолевой активности лекарственного средства может быть вторичной по сравнению с аддуктом O ⁶ -MG, за исключением тех опухолей, которые испытывают дефицит эксцизионной репарации оснований (31 , 32 , 69) .

Снижение устойчивости к темозоломиду

Алкилирующие агенты.

В нескольких доклинических исследованиях изучались методы снижения устойчивости к алкилирующим агентам, таким как темозоломид. Агенты, снижающие уровни AGT или ингибирующие активность пути эксцизионного восстановления, снижают устойчивость к темозоломиду. Помимо упомянутых выше, в нескольких исследованиях изучалось использование агентов, которые ингибируют путь эксцизионного восстановления, но в различных исследованиях (5) использовались комбинации различных алкилирующих агентов для снижения уровней AGT. Эти комбинации характеризовали аддитивные или более чем аддитивные противоопухолевые эффекты и дополнительные профили токсичности. Поскольку темозоломид имеет умеренный профиль токсичности и способность истощать AGT, он может сочетаться с другими алкилирующими агентами, такими как BCNU, при условии, что перекрывающиеся токсические эффекты поддаются контролю (5) .

O ⁶ -BG.

O ⁶ -BG представляет собой низкомолекулярный субстрат для AGT и мощный ингибитор AGT-опосредованной устойчивости к повреждению ДНК хлорэтилнитрозомочевинами и метилирующими агентами (36 , 70 , 71) . Данные доклинических исследований указывают на роль O ⁶ -BG в повышении терапевтического индекса темозоломида. Предварительная обработка O ⁶ -BG усиливает активность темозоломида in vitro и in vivo в опухолевых клетках с высоким уровнем AGT, но мало влияет на опухолевые клетки с низким или неопределяемым уровнем AGT (8 , 33 , 34 , 56 , 72 ) . Однако in vivoусиление активности темозоломида за счет O ⁶ -BG наблюдалось в ксенотрансплантате глиомы человека, полученном из линии клеток с низким содержанием AGT, которые невосприимчивы к повышению активности темозоломида O ⁶ -BG in vitro (73) , что позволяет предположить, что некоторые из них В естественных условиях метаболическое взаимодействие с O ⁶ -BG усиливало активность темозоломида. В этих исследованиях длительное лечение O ⁶ -BG более эффективно, чем разовое лечение (56 , 73) . В модели ксенотрансплантата меланомы человека комбинация O ⁶ -BG и темозоломида, вводимая по 5-дневному графику, привела к большему противоопухолевому эффекту, чем эквитоксическая доза темозоломида. (8) . Комбинация темозоломида и O ⁶ -BG также приводила к задержке роста опухоли, эквивалентной той, которая вызывалась 3-кратно большей дозой темозоломида по тому же 5-дневному графику.

Другие исследования показали, что клетки костного мозга обладают низкой активностью AGT, а истощение AGT с помощью O ⁶ -BG существенно увеличивает чувствительность этих клеток к O ⁶ -алкилирующим агентам, включая BCNU и темозоломид (74 , 75 , 76) . Таким образом, возможно, что гематологическая токсичность может ограничивать дозы O ⁶ -BG и других ингибиторов репарации ДНК, используемых в клинической практике. Исследование влияния предварительной обработки O ⁶ -BG на токсические и кластогенные эффекты темозоломида на гемопоэтические клетки мышей in vivo подтвердило усиление чувствительности клеток костного мозга (75) . Увеличение частоты образования микроядер в костном мозге мышей, предварительно обработанных O ⁶ -BG, наблюдаемое в этом исследовании, также предполагает возможность увеличения частоты вторичных лейкозов.

Попытки снизить токсичность, вызванную этой комбинацией, были сосредоточены на защите нормальной кроветворной ткани путем трансдукции гемопоэтических клеток-предшественников генами O ⁶ -BG-резистентной метилтрансферазы (77 , 78 , 79) . Экспрессия двойной мутантной формы AGT в клетках костного мозга мышей значительно снизила токсичность, продуцируемую темозоломидом в комбинации с O ⁶ -BG, и привела к снижению частоты сочетания индуцированных O ⁶ -BG / темозоломидом микроядер в костный мозг (78) . Хотя трансдукция гемопоэтических клеток-предшественников O ⁶-BG-устойчивые гены метилтрансферазы защищают коммитированные мышиные гемопоэтические предшественники от токсичности O ⁶ -алкилирующих агентов, аналогичный эффект не наблюдается с примитивными мультипотентными колониеобразующими клетками селезенки (76) . В недавнем исследовании Chinnasamy et al. (76) показали, что трансдукция примитивных мультипотентных колониеобразующих клеток селезенки двойным мутантом AGT не приводила к значительной защите от токсичности, вызываемой комбинацией BCNU и O ⁶ -BG. Эти результаты показывают, что защитный эффект, обеспечиваемый трансдукцией гемопоэтических клеток-предшественников O ⁶-BG-устойчивые гены метилтрансферазы могут быть высокоспецифичными по отношению к цитотоксическому агенту и типу клеток (76) . Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, чтобы определить потенциальную клиническую пользу этого типа защитной генетической терапии.

Клинический опыт применения темозоломида при злокачественных глиомах

Первоначальные исследования фазы 1.

Безопасность, ФК и противоопухолевое действие темозоломида первоначально оценивались в испытании фазы 1, спонсируемом CRC (10) . В этом исследовании 51 пациент с запущенным раком получил однократную дозу темозоломида перорально. Абсолютная биодоступность темозоломида также изучалась у пяти из этих пациентов. Темозоломид продемонстрировал примерно 100% биодоступность перорально после в / в по сравнению с по администрации. Пиковые концентрации в плазме наблюдались в пределах 0,33–2 ч после перорального приема, а AUC линейно увеличивалась с дозой. Выведение было столь же быстрым, с периодом полураспада в плазме от 1,6 до 1,8 ч и клиренсом всего тела 12 л / ч. ПК темозоломида был линейным и воспроизводимым с небольшими вариациями между пациентами. Параметры PK не менялись между первой и пятой дозами, что указывает на то, что темозоломид не накапливался после нескольких доз (10) .

На основании зависящей от графика противоопухолевой активности, наблюдаемой с темозоломидом в доклинических исследованиях (3) , еще 42 пациентам была дана однократная пероральная доза темозоломида, начиная с 150 мг / м ² и увеличивая до 240 мг / м ^{2 в} течение 5 дней. в 4-недельном цикле, если не было обнаружено серьезной миелосупрессии. В этой популяции DLT темозоломида представляла собой миелосупрессию от легкой до умеренной (нейтропения и тромбоцитопения), что было предсказуемо и легко контролировалось. МПД составляла 200 мг / м ² в сутки (10) . В результате рекомендуемая доза для исследований фазы 2 составляла 150 мг / м ² для первого курса и, при отсутствии серьезной миелосупрессии, увеличивалась до 200 мг / м ^2.для последующих курсов. Негематологическая токсичность, в основном тошнота и рвота, была легкой и контролировалась стандартными противорвотными средствами. При приеме темозоломида не наблюдалось никаких побочных эффектов со стороны ЦНС или облысения (10) .

Последующие исследования фазы 1 были проведены для оценки безопасности препарата темозоломида в капсулах с машинным наполнением, который отличался от препарата, заполненного вручную, использованного в первоначальном исследовании фазы 1 CRC (80 , 81 , 82 , 83 , 84) .

Эти исследования подтвердили безопасность, переносимость и ФК темозоломида, о которых сообщили Newlands et al. (10) .

Безопасность.

В соответствии с результатами исследования фазы 1, гематологическая токсичность, особенно тромбоцитопения и нейтропения, ограничивала дозу. Нейтропения или тромбоцитопения обычно появлялись через 21–28 дней после приема первой дозы каждого цикла и восстанавливались до миелосупрессии 1 степени в течение 7–14 дней. Токсичность 4 степени проявлялась при кумулятивных пероральных дозах более 1000 мг / м ^{2 в} течение 5 дней, но другой значимой токсичности не наблюдалось. Миелосупрессия 3 или 4 степени обычно встречалась менее чем у 10% обследованных пациентов.

Предшествующее лечение химиотерапией, лучевой терапией или и тем и другим оказывает значительное влияние на МПД темозоломида (83) . Hammond et al. (80) оценили влияние предшествующей миелосупрессивной терапии на токсичность и PK-профиль темозоломида у 24 пациентов с запущенным раком, которые были стратифицированы в соответствии с предыдущим воздействием химиотерапии и радиации. Пациенты обеих категорий получали темозоломид в дозе 100 мг / м ² / день в течение 5 дней, которая была увеличена до 150 и 200 мг / м ² / день в отсутствие миелосупрессии (80) . МПД для темозоломида составляет 150 мг / м ^2./день. В другом аналогичном исследовании фазы 1, опубликованном Национальным институтом рака, оценивалась безопасность темозоломида у пациентов, которые были стратифицированы на основе предшествующего воздействия нитрозомочевины (83) . MTD для пациентов с предшествующим воздействием нитрозомочевины составляло 150 мг / м ² / день, а MTD для пациентов без такого предварительного воздействия составляло 250 мг / м ² / день. Оценка ФК темозоломида показала, что клиренс из плазмы был значительно меньше у пациентов с предшествующим воздействием нитрозомочевины, чем у пациентов без такого предварительного воздействия (83) . Это могло способствовать более низкой дозировке темозоломида, которую переносили эти пациенты, и оказало заметное влияние на рекомендации по дозировке для этих пациентов.

Результаты этих исследований показывают, что доза темозоломида в 200 мг / м ^2, вводимая по 5-дневному графику, повторяемому каждые 28 дней, подходит для пациентов, которые предварительно не получали лучевую терапию, химиотерапию или и то, и другое. Пациенты, которые предварительно проходят курс химиотерапии, получают более низкую начальную дозу темозоломида ( например, 150 мг / м ² ), которая может быть увеличена до 200 мг / м ² в последующих курсах при отсутствии миелосупрессии 3 или 4 степени (80) . Краткое описание схемы приема темозоломида и MTD, которые наблюдались в нескольких завершенных исследованиях фазы 1, представлено в таблице 1 .

ФармоКинетика.

ФК-анализ темозоломида неизменно показывает, что ФК темозоломида линейны, со 100% биодоступностью после перорального введения, и что на 5-й день после 5-дневного приема препарата кумуляции лекарственного средства не происходит. Время достижения максимальной концентрации в плазме ( t _max ) составляет примерно 1 ч. Период полувыведения ( t _1/2 ) составляет 1,6–1,8 ч. Краткое изложение ФК свойств темозоломида у взрослых приведены в таблице 1.

Таблица 1

ФК параметры темозоломида, вводимого один раз в день в течение 5 дней

Исследования po ¹⁴ C-темозоломида у пациентов с запущенным раком (82) показывают, что основным путем его выведения из плазмы является деградация до MTIC с дальнейшей деградацией до AIC. В этих исследованиях темозоломид выводился преимущественно с мочой, при этом 36% дозы выводилось в виде интактного препарата и AIC. Также оценивалось влияние pH желудочного сока и приема пищи на фармакокинетические свойства и пероральную биодоступность темозоломида (85) . Бил и др. (85) оценивали влияние повышения pH желудочного сока за счет применения ранитидина на биодоступность перорально и ПК темозоломида и MTIC в плазме. В этом исследовании на биодоступность перорально, максимальную концентрацию в плазме и период полувыведения темозоломида не влияло увеличение pH желудочного сока на 1-2 единицы в результате приема ранитидина каждые 12 часов в первые 2 или последние 2 дня. 2 дня 5-дневного режима дозирования темозоломида (85) . Введение темозоломида после приема пищи приводит к небольшому снижению доступности перорального введения (84) . Когда темозоломид принимался после еды, наблюдалось небольшое, но статистически значимое снижение (9%) скорости и степени абсорбции. Поскольку доверительные пределы AUC находятся в пределах 80–125% рекомендаций по биоэквивалентности, маловероятно, что это снижение оказывает какое-либо клиническое влияние на противоопухолевую активность темозоломида (84) . Поскольку исследования биодоступности и метаболизма ¹⁴ C-темозоломида показали, что пероральная биодоступность практически полная (82) , пероральная форма препарата использовалась для клинических исследований.

Педиатрические пациенты.

Исследования фазы 1 темозоломида были расширены, чтобы включить пациентов с онкологическими заболеваниями у детей (16) . В исследовании фазы 1, проведенном для определения ФК темозоломида при многократном введении, 20 пациентам в возрасте от 3 до 17 лет давали темозоломид в диапазоне доз 100–240 мг / м ² / день (15) . Пациенты были разделены на группы в соответствии с предшествующим краниоспинальным облучением или терапией нитрозомочевиной. МПД составляло 200 мг / м ^2.для пациентов, которые не получали ранее краниоспинальное облучение или терапию нитрозомочевиной, но не были определены для детей с предшествующим краниоспинальным облучением из-за небольшого числа пациентов. Темозоломид быстро всасывался, его AUC увеличивалась в зависимости от дозировки и не демонстрировала признаков накопления. Полураспада в плазме, клиренс всего тела, а объем распределения не зависели от дозы (Таблица 2) . По сравнению со взрослыми пациентами, получавшими 200 мг / м ² / день, у детей, по-видимому, была более высокая AUC (48,7 против 34,5 мкг · ч / мл), скорее всего, потому, что у детей большее отношение площади поверхности тела к объему (15) . Несмотря на более высокие концентрации в дозах, эквивалентных тем, которые используются у взрослых пациентов, функция костного мозга у педиатрических пациентов, по-видимому, допускает большее воздействие препарата до того, как разовьется DLT костного мозга.

Таблица 2

Противоопухолевое действие.

Как и было предсказано доклиническими оценками (5) , исследования фазы 1 продемонстрировали противоопухолевую активность темозоломида в ряде трудноизлечимых форм рака, для которых не существует удовлетворительного лечения. В исследовании CRC Phase 1 (10) клинические ответы наблюдались у пациентов с рецидивирующей глиомой высокой степени злокачественности, меланомой и грибовидным микозом. Аналогичная противоопухолевая активность наблюдалась и в последующих испытаниях фазы 1, проведенных с капсулами, заполненными машиной. В этих исследованиях темозоломид продемонстрировал клиническую активность против глиом высокой степени злокачественности как у взрослых, так и у детей (84) .

Клинический опыт фазы 2 и 3

Обоснование.

Адъювантная химиотерапия с применением монотерапии нитрозомочевиной или комбинированная терапия для лечения рецидивирующей злокачественной глиомы и злокачественной меланомы далека от удовлетворительного результата. Это в первую очередь связано с de novo или приобретенной устойчивостью к химиотерапевтическим агентам (86) . Хотя алкилирующие агенты, такие как прокарбазин, обладают активностью при лечении злокачественной глиомы, использование этих агентов было связано с высоким уровнем токсичности и лишь умеренным улучшением общей выживаемости (87 , 88 , 89). . В результате существует потребность в новых агентах, которые эффективны и могут использоваться в сочетании с другими агентами или радиацией для преодоления сопротивления. Приемлемый профиль безопасности и клиническая активность темозоломида, наблюдаемые у пациентов со злокачественной глиомой и рецидивирующей астроцитомой, побудили последующие исследования фазы 2 и 3 подтвердить активность темозоломида при этих злокачественных новообразованиях. CRC провел ряд таких исследований, в которых была установлена активность темозоломида в рецидивирующих и вновь диагностированных глиомах.

Первичные опухоли головного мозга.

О’Рейли и др. (12) пролечили 28 пациентов с первичными опухолями головного мозга. Первоначальная доза темозоломида 150 мг / м ² / день вводилась перорально один раз в день в течение 5 дней; эта дозировка была увеличена до 200 мг / м ^2.в день один раз в день в течение 5 дней и повторяется с 28-дневными интервалами, если у пациента не было значительной миелосупрессии на 22 день первого цикла. Лечение переносилось хорошо. Лейкопения 3 степени наблюдалась только в 3 (5%) из 57 курсов, а тромбоцитопения 3 степени наблюдалась только в 4 (7%) из 57 курсов. Из 10 поддающихся оценке пациентов с рецидивирующей астроцитомой после лучевой терапии у 5 наблюдалось значительное улучшение на КТ и полное исчезновение клинических признаков и симптомов, которые сохранялись в течение 3–6 месяцев; У 3 других пациентов на КТ было небольшое снижение или отсутствие изменений, хотя их неврологическое состояние улучшилось (12) . О значительном улучшении КТ также сообщалось у двух из девяти поддающихся оценке пациентов, получавших два курса темозоломида перед облучением черепа по поводу недавно диагностированных астроцитом высокой степени злокачественности; два других показали небольшое улучшение. Три дополнительных поддающихся оценке пациента с первичными опухолями головного мозга, в том числе один с рецидивирующей медуллобластомой после химиотерапии и лучевой терапии, испытали значительное улучшение на КТ, которое сохранялось в течение 6 месяцев (12). Это исследование было расширено на 75 пациентов — 48 с рецидивом заболевания и 27 с новые диагнозы (90) . Улучшение КТ было отмечено у 12 (25%) пациентов с рецидивирующим заболеванием и у восьми (30%) пациентов с новым диагнозом. 22% пациентов с рецидивами и 43% пациентов с впервые выявленными опухолями дожили до 1 года. Хотя наблюдалось явное улучшение качества жизни у респондентов, которые использовали 5-дневный график, нельзя было сделать никаких выводов о влиянии на увеличение выживаемости по сравнению с данными об общей выживаемости, установленными на основе исторических результатов (90) . Однако это исследование подтвердило активность темозоломида в отношении глиом у пациентов, которые не ответили на интенсивную лучевую терапию.

Сходные результаты были получены в многоцентровом исследовании фазы 2, проведенном CRC, в котором оценивался темозоломид у пациентов с диагнозом анапластическая астроцитома, мультиформная глиобластома (степень 4) и неклассифицированная астроцитома высокой степени злокачественности (степени 3-4; (13 ). В этом исследовании объективные ответы, измеряемые по улучшению неврологического статуса, наблюдались у 11 (11%) из 103 пациентов, получавших темозоломид; У 5 из этих пациентов было улучшение на компьютерной томографии или магнитно-резонансной томографии (13). . Еще 47% пациентов в исследовании имели стабильное заболевание. Средняя выживаемость всех пациентов с измеримым ответом составила 5,8 месяцев, а у 22% пациентов не было неврологических или рентгенологических признаков прогрессирования заболевания через 6 месяцев. Результаты этого исследования дополнительно подтвердили активность темозоломида у пациентов с рецидивирующей и прогрессирующей глиомой высокой степени злокачественности.

Недавно в трех открытых межведомственных исследованиях оценивалось использование темозоломида у 525 пациентов со злокачественной глиомой. Эти исследования представляют собой крупнейшую оценку одного агента у пациентов с рецидивирующими злокачественными глиомами, которые строго контролировались с использованием строгих проспективно определенных критериев для оценки ответа опухоли, центрального обзора гистологии и проверенных инструментов для оценки качества жизни, связанного со здоровьем. Первые два испытания оценивали безопасность, эффективность и эффекты QOL , связанные со здоровьем темозоломида у больных с глиобластомой при первом рецидиве и были следующим образом : ( а ) ключевой многоцентровой Фаза 2 исследования , в котором сравнивал ВБП в течение 6 месяцев и безопасности у пациентов, получавших темозоломид, и у пациентов, получавших прокарбазин (91) ; и (b) второе поддерживающее испытание на пациентах с мультиформной глиобластомой для дальнейшего изучения эффективности и связанных со здоровьем аспектов качества жизни темозоломида. В основном исследовании фазы 2 225 пациентов были рандомизированы для приема темозоломида ( n = 112) или прокарбазина ( n = 113; ссылка 91 ). Группы лечения были аналогичными в отношении исходных характеристик заболевания и предшествующих терапий. Объективные ответы (PR или стабильное заболевание) наблюдались у 46% пациентов, получавших темозоломид, и у 33% пациентов, получавших прокарбазин, причем PR наблюдались у 5% пациентов в обеих группах (91). . Пациенты, получавшие темозоломид, имели значительно лучшую 6-месячную ВБП и общую выживаемость, чем пациенты, получавшие прокарбазин (21% в группе темозоломида по сравнению с 9% в группе прокарбазина; P = 0,008). Медиана ВБП также была лучше для темозоломида по сравнению с прокарбазином (2,89 месяца для темозоломида по сравнению с 1,97 месяца для прокарбазина; отношение рисков 1,47; P = 0,0063; ссылка 91. Разница в ВБП в пользу темозоломида наблюдалась уже через 1 месяц после рандомизация, и разница сохранялась в течение нескольких месяцев (рис. 2) . Аналогичные результаты были получены в подтверждающем одноэтапном исследовании, в котором оценивали темозоломид у 138 пациентов с мультиформной глиобластомой. В этом исследовании, лечение с темозоломидом привело к PFS 19% (95% ДИ, 12-26%; ). Эти исследования легли в основу одобрения темозоломида в Европейском союзе для лечения пациентов с мультиформной глиобластомой, у которых наблюдается прогрессирование или рецидив после стандартной терапии.

Рис. 2.

ВБП у пациентов с мультиформной глиобластомой, получавших темозоломид: намерение лечить население.

В третьем исследовании оценивалась безопасность и эффективность темозоломида у взрослых пациентов со злокачественной анапластической астроцитомой при первом рецидиве, у которых возник рецидив после первоначальной терапии (92) . В этом исследовании приняли участие 162 пациента. У 111 из них была подтверждена анапластическая астроцитома или анапластическая смешанная олигоастроцитома. Пациенты, которые ранее не получали химиотерапию, получали начальную дозу 200 мг / м ² po темозоломид ежедневно в течение 5 дней по 28-дневному циклу; пациенты с химиотерапией в анамнезе получали сниженную дозу 150 мг / м ^2./ день, которое увеличивалось в последующих циклах, если не было гематологической токсичности 3 или 4 степени. Патологическое подтверждение диагноза, включая центральный обзор гистологии, требовалось у всех пациентов. В намерениях для лечения населения, ВБП через 6 месяцев составил 46%, а среднее время до прогрессирования составило 5,4 месяца . Средняя общая выживаемость составила 13,6 месяцев, а уровни выживаемости через 6 и 12 месяцев, основанные на оценках Каплана-Мейера, составили 75% (95% ДИ, 69–83%) и 56% (95% ДИ, 50–66%). соответственно (92) . Центральный обзор магнитно-резонансной томографии с усилением гадолиния выявил частоту объективного ответа 35% для популяции, намеревающейся лечиться. Когда была включена популяция стабильного заболевания, общий ответ опухоли составил 61% (92). . В этом исследовании поддержание ВБП и объективный ответ были связаны с улучшением качества жизни, связанным со здоровьем, независимо от использования стероидов. Это исследование документирует эффективность, безопасность и улучшение качества жизни темозоломида у пациентов с рецидивирующей анапластической астроцитомой. На основе этих результатов темозоломид получил ускоренное одобрение FDA для лечения взрослых пациентов с анапластической астроцитомой, у которых возник рецидив после лечения, включающего препарат нитрозомочевины (BCNU или CCNU) и прокарбазин.

Также оценивалось использование темозоломида в лечении пациентов с впервые выявленной злокачественной глиомой (93) . Тридцать три пациента с впервые диагностированной мультиформной глиобластомой и пять пациентов с анапластической астроцитомой получали начальную дозу 200 мг / м ^2.перорально темозоломид ежедневно в течение 5 дней по 28-дневному циклу. Ответы (полные и частичные) наблюдались у 47% пациентов. Среди пациентов с мультиформной глиобластомой 3 достигли полной ремиссии, а 14 — частичной. У одного пациента с анапластической астроцитомой был PR. Интересно, что из 11 опухолей, которые имели 20% или более клеток, окрашенных антителом против AGT, был 1 пациент с PR, 2 — со стабильным заболеванием и 8 — с прогрессированием заболевания. В 25 опухолях, которые имели менее 20% AGT-положительных клеток, было 3 CR, 12 PR, 4 пациента со стабильным заболеванием и 6 пациентов с прогрессированием заболевания. Темозоломид хорошо переносился, миелосупрессия 3 и 4 степени наблюдалась только у 5% пациентов. Тошнота и запор 3 степени наблюдались у 13% пациентов, негематологическая токсичность 4 степени не наблюдалась (93). . Эти результаты предполагают, что темозоломид проявляет активность при недавно диагностированной злокачественной глиоме и что оценка экспрессии белка AGT может выявить людей, которые с большей вероятностью будут реагировать на терапию темозоломидом при злокачественной глиоме.

Злокачественная метастатическая меланома.

Эффективность темозоломида оценивалась в исследовании пациентов с метастатической меланомой на поздней стадии, включая пациентов с метастазами в головной мозг (11) . 56 пациентам давали темозоломид в дозе 150 мг / м ² один раз в день в течение 5 дней. Если миелосупрессия 2 степени или выше не наступила к 22-му дню, последующие 5-дневные курсы (200 мг / м ²/ день) вводили с 28-дневными интервалами. Среди 56 пациентов (49 с поддающимися оценке поражениями) CR произошли у 3, все только с метастазами в легкие, а PR произошли у 9, что дало ответ 21%. Стабильная болезнь наблюдалась еще у восьми пациентов. Средняя продолжительность ответа составляла 6 месяцев (диапазон 2,5–18 месяцев), а среднее время выживания составляло 14,5 месяцев для пациентов, ответивших на лечение, и 4,5 месяца для пациентов, не ответивших на лечение. Лейкопения была основной токсичностью; пять случаев лейкопении 4 степени, два случая тромбоцитопении 4 степени и никаких других токсических эффектов 4 степени у 55 подлежащих оценке пациентов в течение 217 курсов лечения. Эти результаты подтвердили безопасность и эффективность темозоломида при злокачественной метастатической меланоме, которые наблюдались в исследовании фазы 1 (11) .

Во втором исследовании фазы 2 на запущенной злокачественной меланоме оценивалась взаимосвязь между уровнями AGT перед лечением в биоптатах кожных опухолей, включая лимфатические узлы, и клиническим ответом на лечение темозоломидом (94) . Среди 50 пациентов, подлежащих оценке, было 3 CR и 4 PR с общим уровнем ответа 14%. Стабильная болезнь наблюдалась еще у шести пациентов. Лимфоцитопения была основной токсичностью, однако, только в восьми и девяти случаях нейтропении и тромбоцитопении 3 степени и выше соответственно. Анализ уровней AGT перед лечением и клинического ответа на темозоломид у 33 пациентов показал, что уровни AGT перед лечением не являются прогностическими факторами ответа на темозоломид при меланоме (94) .

Недавно в исследовании фазы 3 сравнивали общую выживаемость, ВБП, объективный ответ и безопасность темозоломида и DTIC у 305 пациентов с метастатической меланомой на поздней стадии (95) . В этом исследовании также оценивались связанные со здоровьем QOL и PK обоих препаратов и их метаболита, MTIC. В этом исследовании пациенты были рандомизированы для получения либо потемозоломида в начальной дозе 200 мг / м ² / день в течение 5 дней каждые 28 дней, либо в / в DTIC в начальной дозе 250 мг / м ² / день в течение 5 дней каждые 21 день. дней. Медиана выживаемости в популяции намеренных лечиться была аналогичной для пациентов, получавших темозоломид или DTIC (7,7 и 6,4 месяца для темозоломида и DTIC, соответственно; отношение рисков 1,18), медиана PFS была значительно больше для темозоломида (1,9 месяца) по сравнению сDTIC (1,5 месяца; P = 0,012; отношение рисков = 1,37; CI, 1,07–1,75; ссылка 95 ). Темозоломид был связан с улучшением качества жизни, связанным со здоровьем, при этом большее количество пациентов, принимавших темозоломид, демонстрировали улучшение или сохранение физического функционирования на 12 неделе по сравнению с пациентами, получавшими DTIC. PK-анализ показал, что системное воздействие (AUC) исходного лекарственного средства и активного метаболита MTIC было выше после приема потемозоломида по сравнению с внутривенным DTIC. Эти результаты показывают, что темозоломид демонстрирует эффективность, равную эффективности DTIC, против распространенной метастатической меланомы.

Преодоление сопротивления

Комбинация двух или более лекарств, которые имеют разные цитотоксические механизмы или подвержены различным механизмам устойчивости, может вызывать аддитивные или синергетические эффекты. Благоприятный профиль безопасности темозоломида позволяет назначать его одновременно с различными агентами. Противоопухолевая активность темозоломида зависит от уровня AGT в опухолевой клетке. Результаты доклинических исследований показывают, что ингибирование AGT усиливает активность темозоломида в нескольких линиях опухолевых клеток человека (5) . В нескольких исследованиях изучались методы дальнейшего снижения уровня AGT и усиления противоопухолевого эффекта темозоломида при комбинированной терапии BCNU и различных схемах дозирования.

Темозоломид Сочетание с цисплатином.

Доклинические данные показывают, что цисплатин усиливает противоопухолевую активность темозоломида (96) . На основе этих данных и дополнительных профилей токсичности, Фаза 1 испытания комбинации была проведена у 15 пациентов с распространенным раком (97) . В этом исследовании группы из трех пациентов получали темозоломид ежедневно в течение 5 дней вместе с цисплатином в день 1 в течение 4 недель при следующих уровнях доз темозоломида (мг / м ² / день) и цисплатина (мг / м ² ): 100/75; 120/75; 200/75; и 200/100. DLT, наблюдаемая при наивысшей дозе темозоломида / цисплатина, представляла собой миелосупрессию (нейтропения и тромбоцитопения) и рвоту. МПД, установленные в этом исследовании, составляли 200 мг / м ² / день для темозоломида и 75 мг / м 2.² для цисплатина. Эта комбинация не изменяла PK или MTD темозоломида. Основные негематологические токсические эффекты заключались в тошноте, рвоте и потере слуха. PR был достигнут у 2 из 14 оцениваемых пациентов, один с нелеченым немелкоклеточным раком легкого, а другой — с плоскоклеточным раком.

Сочетание с BCNU.

В исследовании фазы 1, оценивающем комбинацию BCNU (75 мг / м ² ), вводимую до или после 5-дневного курса темозоломида, не было обнаружено различий между схемами в отношении PK темозоломида или токсичности препаратов в дозах. использовали (98) . У одной пациентки с глиобластомой PR сохранялся в течение 1 года, а у двух других пациентов (одна с остеосаркомой и одна с карциносаркомой матки) наблюдались незначительные реакции. Это исследование продолжается, чтобы можно было установить MTD для этой комбинации (98) .

Комбинация с IFN-α-2b.

И темозоломид, и IFN-α-2b продемонстрировали противоопухолевую активность в отношении меланомы. IFN-α-2b одобрен в США для послеоперационного адъювантного лечения меланомы с метастазами высокого риска. В некоторых европейских странах он одобрен для использования в качестве монотерапии для паллиативного лечения меланомы. В исследовании фазы 1 по определению MTD и DLT пациентов с гистологически подтвержденными, хирургически неизлечимыми метастатическими меланомами лечили 5-дневными курсами потемозоломида в дозах 100 или 200 мг / м ² / день с непрерывными подкожными инъекциями IFN- α-2b три раза в неделю при возрастающих дозах, начиная с 5 мЕд / м ²(99) . В когорте, получавшей темозоломид в дозе 1000 мг / м ² и 5 мЕд / м ^2.При приеме IFN-α-2b у двух пациентов развилась ограничивающая дозу тромбоцитопения, а у одного пациента — нейтропения 4 степени. Когда более высокие дозы IFN-α-2b (7,5 и 10,0 мЕд / м ² ) были объединены с 150 мг / м ² темозоломида, гематологическая токсичность 4 степени наблюдалась у одного из шести и одного из трех пациентов, соответственно. ДЛТ не наблюдалось у пациентов, получавших 750 мг / м ² темозоломида плюс 5 мЕд / м ² IFN-α-2b. МПД определяли как темозоломид 150 мг / м ² и IFN-α-2b 7,5 мЕ / м ²(99). . Противоопухолевые реакции наблюдались у 3 из 12 пациентов, а стабильное заболевание — у 4 из 12 пациентов. Эти результаты показывают, что эта комбинация при введении в MTD хорошо переносится, и наблюдаемая противоопухолевая активность обеспечивает основу для дополнительных исследований.

График непрерывного дозирования.

Поскольку уровни AGT могут восстанавливаться в течение 24-часового интервала между отдельными дозами темозоломида в каждом 5-дневном цикле, дозирование чаще, чем один раз в день в течение 5 дней, может улучшить ответ на лечение. В исследовании фазы 1 с участием 24 пациентов с рецидивирующими опухолями, 17 из которых были злокачественными глиомами (81) , изучали непрерывное дозирование темозоломида в течение 6-7-недельного периода с дозировками от 50 до 100 мг / м ² / день. Этот график давал более высокую кумулятивную дозу препарата, чем указанный 5-дневный график, и увеличивал AUC в 2,1 раза без какого-либо гематологического DLT. При дозировке 75 мг / м ² / день серьезной токсичности не наблюдалось (81). . Об объективных ответах сообщалось у пациентов с глиомой и меланомой высокой степени злокачественности, а общий ответ на длительный курс лечения составил 33%. Семь (41%) из 17 пациентов с глиомой продемонстрировали опухолевый ответ. У шести из 17 пациентов с глиомой сохранялась стабильная болезнь (81) .

Резюме и выводы

Темозоломид — это новое и эффективное противоопухолевое средство, вводимое перорально, которое демонстрирует широкий спектр действия при различных солидных опухолях и распределяется по всем тканям, включая мозг. Он спонтанно превращается в активный метилирующий агент с активностью против ряда рефрактерных видов рака, включая злокачественную глиому, метастатическую меланому и другие солидные опухоли. Темозоломид хорошо переносится, с минимальной миелосупрессией, не кумулятивной и с негематологической токсичностью, которая легко купируется стандартными противорвотными средствами.

Уникальные характеристики стабильности и растворимости позволяют темозоломиду легко абсорбироваться и распределяться по всем тканям с приблизительно 100% биодоступностью после перорального введения. Таким образом, темозоломид не требует метаболизма в печени для активации и способен проникать через гематоэнцефалический барьер. Темозоломид демонстрирует линейную ПК, быстро выводится и не накапливается при повторном дозировании. Его PK дает небольшую внутрипредметную или межпредметную вариабельность, что проявляется в его предсказуемой клинической переносимости и легком профиле побочных эффектов.

Небольшой успех наблюдался при использовании BCNU, CCNU или прокарбазина в качестве отдельных агентов или в составе комбинированной химиотерапии для лечения глиом высокой степени злокачественности; хирургия и лучевая терапия остаются методами лечения первой линии (87 , 100) . Эти агенты сильно цитотоксичны или плохо переносятся, а резистентность развивается быстро, что ограничивает минимальные преимущества, предлагаемые лечением этими препаратами (87). . Предварительные клинические исследования, проведенные CRC, показали, что темозоломид обладает значительной эффективностью и приемлемым профилем безопасности при лечении пациентов со злокачественной глиомой. Результаты были подтверждены в трех открытых мультиинституциональных исследованиях, которые представляют собой самую крупную оценку одного агента у пациентов с рецидивирующими злокачественными глиомами, с использованием строгих проспективно определенных критериев для оценки ответа опухоли, центрального обзора гистологии и проверенных инструментов. для оценки качества жизни, связанного со здоровьем. Темозоломид также продемонстрировал активность у пациентов с недавно диагностированной глиомой. Переносимость и простота введения темозоломида имеют особое клиническое значение для лечения детской глиомы, для которой химиотерапия часто является основным методом (87) .

Хотя запущенная меланома относительно устойчива к терапии, сообщалось, что несколько модификаторов биологического ответа и цитотоксических агентов вызывают объективные ответы, включая DTIC, IFN-α-2b и интерлейкин 2 (101) . Уровень объективных ответов для DTIC составляет 15–20%, и он дает ограниченное количество устойчивых ответов. Хотя различные комбинированные схемы химиотерапии ( например, DTIC, тамоксифен) и цитокинов ( например, интерлейкин 2, IFN-α-2b) увеличили частоту ремиссии и улучшили частоту ответа на 50%, ни один единственный агент не улучшил показатели выживаемости. по сравнению с результатами, полученными только с DTIC у пациентов с метастатическим злокачественным заболеванием (101) . Кроме того, химиотерапевтические схемы, используемые для лечения метастатического злокачественного заболевания, неэффективны при метастазах в мозг. Таким образом, для достижения длительного контроля метастатической меланомы необходимо использовать агенты, эффективные против метастазов в ЦНС. Темозоломид демонстрирует активность, сопоставимую с активностью DTIC в отношении запущенной злокачественной меланомы, и может предложить альтернативу DTIC из-за его способности проникать через гематоэнцефалический барьер.

Таким образом, уникальный фармакологический профиль темозоломида, его доступность в качестве перорального средства и документально подтвержденная безопасность и эффективность подтверждают его потенциал в лечении злокачественной глиомы и злокачественной меланомы. Будущие исследования будут сосредоточены на различных типах комбинированной терапии, интенсификации доз и исследованиях по подбору доз с новыми схемами дозирования. Многие опухоли, включая саркому, толстую кишку, легкие и простату, устойчивы к стандартной химиотерапии, а темозоломид проявляет синергетическую или аддитивную активность в сочетании с другими химиотерапевтическими агентами ( например, BCNU, цисплатин) или модификаторами биологического ответа ( например,IFN-α-2b) был зарегистрирован во многих из этих химорезистентных типов опухолей. Кроме того, возможность более предсказуемой токсичности, повышенной противоопухолевой активности и активности метастазов в ЦНС может привести к улучшению терапевтического индекса и качества жизни, связанного со здоровьем.

Продолжаются исследования рецидивирующей глиомы для изучения стандартного 5-дневного режима приема темозоломида с другими цитотоксическими агентами, включая 6-тиогуанин (Gliadel; BCNU) пластинку, а также цис- ретиноевую кислоту. Исследования злокачественной метастатической меланомы в настоящее время изучают возможность использования стандартного 5-дневного режима темозоломида в сочетании с режимами биохимиотерапии. Наконец, запланированы дополнительные исследования фазы 2 для изучения противоопухолевой активности стандартного 5-дневного режима темозоломида в сочетании с таксанами, вызывающими антимикротрубочковые агенты ( например, паклитакселом, доцетакселом); ингибиторы топоизомеразы I и II ( например, противоопухолевые антибиотики, камптотецин, топотекан); и ингибитор ангиогенеза талидомид.

Dolan M. E., Moschel R. C., Pegg A. E. Depletion of mammalian O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity by O⁶-benzylguanine provides a means to evaluate the role of this protein in protection against carcinogenic and therapeutic alkylating agents. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 87: 5368-5372, 1990.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2164681/)
D’Atri S., Piccioni D., Castellano A., Tuorto V., Franchi A., Lu K., Christiansen N., Frankel S., Rustum Y. M., Papa G., Mandelli F., Bonmassar E. Chemosensitivity to triazene compounds and O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase levels: studies with blasts of leukaemic patients. Ann. (https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7619755/)
Drummond J. T., Li G. M., Longley M. J., Modrich P. Isolation of an hMSH2–p160 heterodimer that restores DNA mismatch repair to tumor cells. Science (Washington, DC), 268: 1909-1912, 1995.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7604264/)
Palombo F., Gallinari P., Iaccarino I., Lettieri T., Hughes M., D’Arrigo A., Truong O., Hsuan J. J., Jiricny J. GTBP, a 160-kilodalton protein essential for mismatch-binding activity in human cells. Science (Washington, DC), 268: 1912-1914, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7604265/)
Li G. M., Modrich P. Restoration of mismatch repair to nuclear extracts of H6 colorectal tumor cells by a heterodimer of human MutL homologs. Proc. Am. Assoc. Cancer Res., 92: 1950-1954, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7892206/)
Karran P., Macpherson P., Ceccotti S., Dogliotti E., Griffin S., Bignami M. O⁶-methylguanine residues elicit DNA repair synthesis by human cell extracts. J. Biol. Chem., 268: 15878-15886, 1993.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8340413/)
Taverna P., Catapano C. V., Citti L., Bonfanti M., D’Incalci M. Influence of O⁶-methylguanine on DNA damage and cytotoxicity of temozolomide in L1210 mouse leukemia sensitive and resistant to chloroethylnitrosoureas. Anticancer Drugs, 3: 401-405, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1421437/)
Karran P., Hampson R. Genomic instability and tolerance to alkylating agents. Cancer Surv., 28: 69-85, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8977029/)
Karran P., Bignami M. Self-destruction and tolerance in resistance of mammalian cells to alkylation damage. Nucleic Acids Res., 20: 2933-2940, 1992.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1620587/)
Tentori L., Graziani G., Gilberti S., Lacal P. M., Bonmassar E., D’Atri S. Triazene compounds induce apoptosis in O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase deficient leukemia cell lines. Leukemia, 9: 1888-1895, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7475280/)
Bianchi R., Citti L., Beghetti R., Romani L., D’Incalci M., Puccetti P., Fioretti M. C. O⁶-Methylguanine-DNA methyltransferase activity and induction of novel immunogenicity in murine tumor cells treated with methylating agents. Cancer Chemother. Pharmacol., 29: 277-282, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1537073/)
Allegrucci M., Fuschiotti P., Puccetti P., Romani L., Fioretti M. C. Changes in the tumorigenic and metastatic properties of murine melanoma cells treated with a triazene derivative. Clin. Exp. Metastasis, 7: 329-341, 1989.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2924449/)
Tentori L., Leonetti C., Aquino A. Temozolomide reduces the metastatic potential of Lewis lung carcinoma (3LL) in mice: role of α-6 integrin phosphorylation. Eur. J. Cancer, 31A: 746-754, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7640049/)
Tisdale M. J. Antitumour imidazotetrazines—XVIII. Modification of the level of 5-methylcytosine in DNA by 3-substituted imidazotetrazinones. Biochem. Pharmacol., 38: 1097-1101, 1989.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2706009/)
Hepburn P. A., Tisdale M. J. Growth suppression by DNA from cells treated with imidazotetrazinones. Biochem. Pharmacol., 41: 339-343, 1991.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1994893/)
Zucchetti M., Catapano C. V., Filippeschi S., Erba E., D’Incalci M. Temozolomide induced differentiation of K562 leukemia cells is not mediated by gene hypomethylation. Biochem. Pharmacol., 38: 2069-2075, 1989.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/2660797/)
Pegg A. E., Dolan M. E., Moschel R. C. Structure, function, and inhibition of O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase. Prog. Nucleic Acid Res. Mol. Biol., 51: 167-223, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7659775/)
D’Incalci M., Citti L., Taverna P., Catapano C. V. Importance of the DNA repair enzyme O⁶-alkyl guanine alkyltransferase (AT) in cancer chemotherapy. Cancer Treat. Rev., 15: 279-292, 1988.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3071420/)
Pegg A. E., Byers T. L. Repair of DNA containing O⁶-alkylguanine. FASEB J., 6: 2302-2310, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1544541/)
Tisdale M. J. Antitumor imidazotetrazines–XV. Role of guanine O6 alkylation in the mechanism of cytotoxicity of imidazotetrazinones. Biochem. Pharmacol., 36: 457-462, 1987.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3470008/)

Baer J. C., Freeman A. A., Newlands E. S., Watson A. J., Rafferty J. A., Margison G. P. Depletion of O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase correlates with potentiation of temozolomide and CCNU toxicity in human tumour cells. Br. J. Cancer, 67: 1299-1302, 1993.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8512814/)
Redmond S. M., Joncourt F., Buser K., Ziemiecki A., Altermatt H. J., Fey M., Margison G., Cerny T. Assessment of P-glycoprotein, glutathione-based detoxifying enzymes and O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase as potential indicators of constitutive drug resistance in human colorectal tumors. Cancer Res., 51: 2092-2097, 1991.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1672623/)
Franchi A., Papa G., D’Atri S., Piccioni D., Masi M., Bonmassar E. Cytotoxic effects of dacarbazine in patients with acute myelogenous leukemia: a pilot study. Haematologica, 77: 146-150, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1398299/)
Wang G., Weiss C., Sheng P., Bresnick E. Retrovirus-mediated transfer of the human O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase gene into a murine hematopoietic stem cell line and resistance to the toxic effects of certain alkylating agents. Biochem. Pharmacol., 51: 1221-1228, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8645346/)
Walker M. C., Masters J. R. W., Margison G. P. O⁶-alkylguanine-DNA-alkyltransferase activity and nitrosourea sensitivity in human cancer cell lines. Br. J. Cancer, 66: 840-843, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/4016790/)
Bobola M. S., Tseng S. H., Blank A., Berger M. S., Silber J. R. Role of O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase in resistance of human brain tumor cell lines to the clinically relevant methylating agents temozolomide and streptozotocin. Clin. Cancer Res., 2: 735-741, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9816224/)
Liu L., Markowitz S., Gerson S. L. Mismatch repair mutations override alkyltransferase in conferring resistance to temozolomide but not to 1,3-bis(2-chloroethyl)nitrosourea. Cancer Res., 56: 5375-5379, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8968088/)
Friedman H. S., Johnson S. P., Dong Q., Schold S. C., Rasheed B. K. A., Bigner S. H., Ali-Osman F., Dolan E., Colvin O. M., Houghton P., Germain G., Drummond J. T., Keir S., Marcelli S., Bigner D. D., Modrich P. Methylator resistance mediated by mismatch repair deficiency in a glioblastoma multiforme xenograft. Cancer Res., 57: 2933-2936, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9230204/)
Tisdale M. J. Antitumour imidazotetrazines-XI: effect of 8-carbamoyl-3-methylimidazo[5,1-d]-1,2,3,5-tetrazin-4(3H)-one [CCRG 81045; M and B 39831 NSC 362856] on poly(ADP-ribose) metabolism. Br. J. Cancer, 52: 789-792, 1985.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3864485/)
Durkacz B. W., Omidiji O., Gray D. A., Shall S. (ADP-ribose)_n participates in DNA excision repair. Nature (Lond.), 283: 593-596, 1980.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6243744/)
Boulton S., Pemberton L. C., Porteous J. K., Curtin N. J., Griffin R. J., Golding B. T., Durkacz B. W. Potentiation of temozolomide-induced cytotoxicity: a comparative study of the biological effects of poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors. Br. J. Cancer, 72: 849-856, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7547230/)
Wu Z., Chan C. L., Eastman A., Bresnick E. Expression of human O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase in Chinese hamster ovary cells and restoration of cellular resistance to certain N-nitroso compounds. Mol. Carcinog., 4: 482-488, 1991.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1793486/)
Tentori L., Turriziani M., Franco D., Serafino A., Levati L., Roy R., Bonmassar E., Graziani G. Treatment with temozolomide and poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors induces early apoptosis and increases base excision repair gene transcripts in leukemic cells resistant to triazene compounds. Leukemia, 13: 901-909, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10360379/)
Imperatori L., Damia G., Taverna P., Garattini E., Citti L., Boldrini L., D’Incalci M. 3T3 NIH murine fibroblasts and B78 murine melanoma cells expressing the Escherichia coli N³-methyladenine-DNA glycosylase I do not become resistant to alkylating agents. Carcinogenesis (Lond.), 15: 533-537, 1994.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8118939/)
Friedman H. S., Dolan M. E., Moschel R. C., Pegg A. E., Felker G. M., Rich J., Bigner D. D., Schold S. C. J. Enhancement of nitrosourea activity in medulloblastoma and glioblastoma multiforme. J. Natl. Cancer Inst., 84: 1926-1931, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1334154/)
Dolan M. E., Pegg A. E. O⁶-benzylguanine and its role in chemotherapy. Clin. Cancer Res., 3: 837-847, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815757/)
Middleton M. R., Kelly J., Thatcher N., Donnelly D. J., McElhinney R. S., McMurry T. B., McCormick J. E., Margison G. P. O⁶-(4-bromothenyl)guanine improves the therapeutic index of temozolomide against A375M melanoma xenografts. Int. J. Cancer, 85: 248-252, 2000.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10629085/)
Wedge S. R., Newlands E. S. O⁶-Benzylguanine enhances the sensitivity of a glioma xenograft with low O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity to temozolomide and BCNU. Br. J. Cancer, 73: 1049-1052, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8624262/)
Fairbairn L. J., Watson A. J., Rafferty J. A., Elder R. H., Margison G. P. O⁶-benzylguanine increases the sensitivity of human primary bone marrow cells to the cytotoxic effects of temozolomide. Exp. Hematol., 23: 112-116, 1995.((https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7828668/))
Chinnasamy N., Rafferty J. A., Hickson I., Ashby J., Tinwell H., Margison G. P., Dexter T. M., Fairbairn L. J. O⁶-benzylguanine potentiates the in vivo toxicity and clastogenicity of temozolomide and BCNU in mouse bone marrow. Blood, 89: 1566-1573, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9057638/)
Chinnasamy N., Rafferty J., Lashford L., Chinnasamy D., Margison G., Thatcher N., Dexter T., Fairbairn L. Protection of committed murine haemopoietic progenitors against BCNU toxicity does not predict protection of primitive, multipotent spleen colony-forming cells—implications for chemoprotective gene therapy. Leukemia, 13: 1776-1783, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10557052/)
Reese J. S., Davis B. M., Liu L., Gerson S. L. Simultaneous protection of G156A methylguanine DNA methyltransferase gene-transduced hematopoietic progenitors and sensitization of tumor cells using O⁶-benzylguanine and temozolomide. Clin. Cancer Res., 5: 163-169, 1999.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9918215/)
Chinnasamy N., Rafferty J. A., Hickson I., Lashford L. S., Longhurst S. J., Thatcher N., Margison G. P., Dexter T. M., Fairbairn L. J. Chemoprotective gene transfer II: multilineage in vivo protection of haemopoiesis against the effects of an antitumour agent by expression of a mutant human O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase. Gene Ther., 5: 842-847, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9747465/)
Hickson I., Fairbairn L. J., Chinnasamy N., Lashford L. S., Thatcher N., Margison G. P., Dexter T. M., Rafferty J. A. Chemoprotective gene transfer I: transduction of human haemopoietic progenitors with O⁶-benzylguanine-resistant O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase attenuates the toxic effects of O⁶-alkylating agents in vitro. Gene Ther., 5: 835-841, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9747464/)
Hammond L. A., Eckardt J. R., Baker S. D., Eckhardt S. G., Dugan M., Forral K., Reidenberg P., Statkevich P., Weiss G. R., Rinaldi D. A., Von Hoff D. D., Rowinsky E. K. Phase I and pharmacokinetic study of temozolomide on a daily-for-5-days schedule in patients with advanced solid malignancies. J. Clin. Oncol., 17: 2604 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10561328/)
Brock C. S., Newlands E. S., Wedge S. R., Bower M., Evans H., Colquhoun I., Roddie M., Glaser M., Brampton M. H., Rustin G. J. S. Phase I trial of temozolomide using an extended continuous oral schedule. Cancer Res., 58: 4363-4367, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9766665/)
Baker S. D., Wirth M., Statkevich P., Reidenberg P., Alton K., Sartorius S. E., Dugan M., Cutler D., Batra V., Grochow L. B., Donehower R. C., Rowinsky E. K. Absorption, metabolism, and excretion of ¹⁴C-temozolomide following oral administration to patients with advanced cancer. Clin. Cancer Res., 5: 309-317, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10037179/)
Dhodapkar M., Rubin J., Reid J. M., Burch P. A., Pitot H. C., Buckner J. C., Ames M. M., Suman V. J. Phase I trial of temozolomide (NSC 362856) in patients with advanced cancer. Clin. Cancer Res., 3: 1093-1100, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815788/)
Brada M., Judson I., Beale P., Moore S., Reidenberg P., Statkevich P., Dugan M., Batra V., Cutler D. Phase I dose-escalation and pharmacokinetic study of temozolomide (SCH 52365) for refractory or relapsing malignancies. Br. J. Cancer, 81: 1022-1030, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10576660/)
Beale P., Judson I., Moore S., Statkevich P., Marco A., Cutler D. L., Reidenberg P., Brada M. Effect of gastric pH on the relative oral bioavailability and pharmacokinetics of temozolomide. Cancer Chemother. Pharmacol., 44: 389-394, 1999.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10501912/)
Feun L. G., Savaraj N., Landy H. J. Drug resistance in brain tumors. J. Neurooncol., 20: 165-176, 1994.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9407635/)
Prados M. D., Russo C. Chemotherapy of brain tumors. Semin. Surg. Oncol., 14: 88-95, 1998.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9407635/)
Pech I. V., Peterson K., Cairncross J. G. Chemotherapy for brain tumors. Oncology, 12: 537-553, 1998.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9575527/)
Rodriguez L. A., Levin V. A. Does chemotherapy benefit the patient with a central nervous system glioma? [see comments]. Oncology (Huntingt), 1: 29-36, 1987.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3079493/)
Newlands E. S., O’Reilly S. M., Glaser M. G., Bower M., Evans H., Brock C., Brampton M. H., Colquhoun I., Lewis P., RiceEdwards J. M., Illingworth R. D., Richards P. G. The Charing Cross Hospital experience with temozolomide in patients with gliomas. Eur. J. Cancer, 32A: 2236-2241, 1996.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9038604/)
Yung A., Levin V. A., Albright R., Olson J., Fredericks R., Fink K., Prados M., Brada M., Spence A., Brunner J., Yue N., Dugan M. H., Zaknoen S., Temodal Brain Tumor Group. Randomized trial of temodal (TEM) vs. procarbazine (PCB) in glioblastoma multiforme (GBM) at first relapse. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 18: 139 1999.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10944597/)
Yung W. K., Prados M. D., Yaya-Tur R., Rosenfeld S. S., Brada M., Friedman H. S., Albright R., Olson J., Chang S. M., O’Neill A. M., Friedman A. H., Bruner J., Yue N., Dugan M., Zaknoen S., Levin V. A. Multicenter Phase II trial of temozolomide in patients with anaplastic astrocytoma or anaplastic oligoastrocytoma at first relapse. J. Clin. Oncol., 17: 2762 1999.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32164579/)
Friedman H. S., McLendon R. E., Kerby T., Dugan M., Bigner S. H., Henry A. J., Ashley D. M., Krischer J., Lovell S., Rasheed K., Marchev F., Seman A. J., Cokgor I., Rich J., Stewart E., Colvin O. M., Provenzale J. M., Bigner D. D., Haglund M. M., Friedman A. H., Modrich P. L. DNA mismatch repair and O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase analysis and response to Temodal in newly diagnosed malignant glioma. J. Clin. Oncol., 16: 3851-3857, 1998.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9850030/)
Middleton M. R., Lunn J. M., Morris C., Rustin G., Wedge S. R., Brampton M. H., Lind M. J., Lee S. M., Newell D. R., Bleehen N. M., Newlands E. S., Calvert A. H., Margison G. P., Thatcher N. O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase in pretreatment tumour biopsies as a predictor of response to temozolomide in melanoma. Br. J. Cancer, 78: 1199-1202, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9820180/)
Middleton M. R., Grob J. J., Aaronson N., Fierlbeck G., Tilgen W., Seiter S., Gore M., Aamdal S., Cebon J., Coates A., Dreno B., Henz M., Schadendorf D., Kapp A., Weiss J., Fraass U., Statkevich P., Muller M., Thatcher N. Randomized Phase III study of temozolomide versus dacarbazine in the treatment of patients with advanced metastatic malignant melanoma. J. Clin. Oncol., 18: 158-166, 2000.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15829494/)
Piccioni D., D’Atri S., Papa G., Caravita T., Franchi A., Bonmassar E., Graziani G. Cisplatin increases sensitivity of human leukemic blasts to triazene compounds. J. Chemother., 7: 224-229, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7562019/)
Britten C. D., Rowinsky E. K., Baker S. D., Agarwala S. S., Eckardt J. R., Barrington R., Diab S. G., Hammond L. A., Johnson T., Villalona-Calero M., Fraass U., Statkevich P., Von Hoff D. D., Eckhardt S. G. A Phase I and pharmacokinetic study of temozolomide and cisplatin in patients with advanced solid malignancies. Clin. Cancer Res., 5: 1629-1637, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10430061/)
Hammond L., Eckardt J., Kuhn J., Rizzo J., Johnson T., Villalona-Calero M., Smith L., Drengler R., Campbell L., Von Hoff D., Rowinsky E. Phase I and pharmacokinetic (PK) trial of sequences of BCNU and temozolomide (TMZ) in patients with solid neoplasms. Ann. Oncol., 9(Suppl.2): 441 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10430061/)
Kirkwood J. M., Agarwala S. S., Diaz B., Donnelly S., Statkevich P., Dugan M. Phase I study of temozolomide in combination with interferon α-2b in metastatic malignant melanoma. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 16: 491 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/16845333/)
McVie J. G. The therapeutic challenge of gliomas. Eur. J. Cancer, 29A: 936-939, 1993.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22677165/)
Agarwala S. S., Kirkwood J. M. Adjuvant therapy of melanoma. Semin. Surg. Oncol., 14:302-310, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/6243744/)
Boulton S., Pemberton L. C., Porteous J. K., Curtin N. J., Griffin R. J., Golding B. T., Durkacz B. W. Potentiation of temozolomide-induced cytotoxicity: a comparative study of the biological effects of poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors. Br. J. Cancer, 72: 849-856, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7547230/)
Wu Z., Chan C. L., Eastman A., Bresnick E. Expression of human O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase in Chinese hamster ovary cells and restoration of cellular resistance to certain N-nitroso compounds. Mol. Carcinog., 4:482-488, 1991.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1793486/)
Tentori L., Turriziani M., Franco D., Serafino A., Levati L., Roy R., Bonmassar E., Graziani G. Treatment with temozolomide and poly(ADP-ribose) polymerase inhibitors induces early apoptosis and increases base excision repair gene transcripts in leukemic cells resistant to triazene compounds. Leukemia, 13: 901-909, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10360379/)
Imperatori L., Damia G., Taverna P., Garattini E., Citti L., Boldrini L., D’Incalci M. 3T3 NIH murine fibroblasts and B78 murine melanoma cells expressing the Escherichia coli N³-methyladenine-DNA glycosylase I do not become resistant to alkylating agents. Carcinogenesis (Lond.), 15: 533-537, 1994.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8118939/)
Friedman H. S., Dolan M. E., Moschel R. C., Pegg A. E., Felker G. M., Rich J., Bigner D. D., Schold S. C. J. Enhancement of nitrosourea activity in medulloblastoma and glioblastoma multiforme. J. Natl. Cancer Inst., 84:1926-1931, 1992.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/1334154/)
Dolan M. E., Pegg A. E. O⁶-benzylguanine and its role in chemotherapy. Clin. Cancer Res., 3: 837-847, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815757/)
Middleton M. R., Kelly J., Thatcher N., Donnelly D. J., McElhinney R. S., McMurry T. B., McCormick J. E., Margison G. P. O⁶-(4-bromothenyl)guanine improves the therapeutic index of temozolomide against A375M melanoma xenografts. Int. J. Cancer, 85:248-252, 2000.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10629085/)
Wedge S. R., Newlands E. S. O⁶-Benzylguanine enhances the sensitivity of a glioma xenograft with low O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase activity to temozolomide and BCNU. Br. J. Cancer, 73: 1049-1052, 1996.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8624262/)
Fairbairn L. J., Watson A. J., Rafferty J. A., Elder R. H., Margison G. P. O⁶-benzylguanine increases the sensitivity of human primary bone marrow cells to the cytotoxic effects of temozolomide. Exp. Hematol., 23:112-116, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7828668/)
Chinnasamy N., Rafferty J. A., Hickson I., Ashby J., Tinwell H., Margison G. P., Dexter T. M., Fairbairn L. J. O⁶-benzylguanine potentiates the in vivo toxicity and clastogenicity of temozolomide and BCNU in mouse bone marrow. Blood, 89: 1566-1573, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9057638/)
Chinnasamy N., Rafferty J., Lashford L., Chinnasamy D., Margison G., Thatcher N., Dexter T., Fairbairn L. Protection of committed murine haemopoietic progenitors against BCNU toxicity does not predict protection of primitive, multipotent spleen colony-forming cells—implications for chemoprotective gene therapy. Leukemia, 13: 1776-1783, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10557052/)
Reese J. S., Davis B. M., Liu L., Gerson S. L. Simultaneous protection of G156A methylguanine DNA methyltransferase gene-transduced hematopoietic progenitors and sensitization of tumor cells using O⁶-benzylguanine and temozolomide. Clin. Cancer Res., 5: 163-169, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9918215/)
Chinnasamy N., Rafferty J. A., Hickson I., Lashford L. S., Longhurst S. J., Thatcher N., Margison G. P., Dexter T. M., Fairbairn L. J. Chemoprotective gene transfer II: multilineage in vivo protection of haemopoiesis against the effects of an antitumour agent by expression of a mutant human O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase. Gene Ther., 5: 842-847, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9747465/)
Hickson I., Fairbairn L. J., Chinnasamy N., Lashford L. S., Thatcher N., Margison G. P., Dexter T. M., Rafferty J. A. Chemoprotective gene transfer I: transduction of human haemopoietic progenitors with O⁶-benzylguanine-resistant O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase attenuates the toxic effects of O⁶-alkylating agents in vitro. Gene Ther., 5: 835-841, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9747464/)
Hammond L. A., Eckardt J. R., Baker S. D., Eckhardt S. G., Dugan M., Forral K., Reidenberg P., Statkevich P., Weiss G. R., Rinaldi D. A., Von Hoff D. D., Rowinsky E. K. Phase I and pharmacokinetic study of temozolomide on a daily-for-5-days schedule in patients with advanced solid malignancies. J. Clin. Oncol., 17: 2604 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10561328/)
Brock C. S., Newlands E. S., Wedge S. R., Bower M., Evans H., Colquhoun I., Roddie M., Glaser M., Brampton M. H., Rustin G. J. S. Phase I trial of temozolomide using an extended continuous oral schedule. Cancer Res., 58:4363-4367, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9766665/)
Baker S. D., Wirth M., Statkevich P., Reidenberg P., Alton K., Sartorius S. E., Dugan M., Cutler D., Batra V., Grochow L. B., Donehower R. C., Rowinsky E. K. Absorption, metabolism, and excretion of ¹⁴C-temozolomide following oral administration to patients with advanced cancer. Clin. Cancer Res., 5: 309-317, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10037179/)
Dhodapkar M., Rubin J., Reid J. M., Burch P. A., Pitot H. C., Buckner J. C., Ames M. M., Suman V. J. Phase I trial of temozolomide (NSC 362856) in patients with advanced cancer. Clin. Cancer Res., 3: 1093-1100, 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9815788/)
Brada M., Judson I., Beale P., Moore S., Reidenberg P., Statkevich P., Dugan M., Batra V., Cutler D. Phase I dose-escalation and pharmacokinetic study of temozolomide (SCH 52365) for refractory or relapsing malignancies. Br. J. Cancer, 81:1022-1030, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10576660/)
Beale P., Judson I., Moore S., Statkevich P., Marco A., Cutler D. L., Reidenberg P., Brada M. Effect of gastric pH on the relative oral bioavailability and pharmacokinetics of temozolomide. Cancer Chemother. Pharmacol., 44: 389-394, 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10501912/)
Feun L. G., Savaraj N., Landy H. J. Drug resistance in brain tumors. J. Neurooncol., 20: 165-176, 1994.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7807193/)
Prados M. D., Russo C. Chemotherapy of brain tumors. Semin. Surg. Oncol., 14: 88-95, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9407635/)
Pech I. V., Peterson K., Cairncross J. G. Chemotherapy for brain tumors. Oncology, 12: 537-553, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9575527/)
Rodriguez L. A., Levin V. A. Does chemotherapy benefit the patient with a central nervous system glioma? [see comments]. Oncology (Huntingt), 1: 29-36, 1987.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/3079493/)
Newlands E. S., O’Reilly S. M., Glaser M. G., Bower M., Evans H., Brock C., Brampton M. H., Colquhoun I., Lewis P., RiceEdwards J. M., Illingworth R. D., Richards P. G. The Charing Cross Hospital experience with temozolomide in patients with gliomas. Eur. J. Cancer, 32A: 2236-2241, 1996.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9038604/)
Yung A., Levin V. A., Albright R., Olson J., Fredericks R., Fink K., Prados M., Brada M., Spence A., Brunner J., Yue N., Dugan M. H., Zaknoen S., Temodal Brain Tumor Group. Randomized trial of temodal (TEM) vs. procarbazine (PCB) in glioblastoma multiforme (GBM) at first relapse. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 18:139 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/10944597/)
,Yung W. K., Prados M. D., Yaya-Tur R., Rosenfeld S. S., Brada M., Friedman H. S., Albright R., Olson J., Chang S. M., O’Neill A. M., Friedman A. H., Bruner J., Yue N., Dugan M., Zaknoen S., Levin V. A. Multicenter Phase II trial of temozolomide in patients with anaplastic astrocytoma or anaplastic oligoastrocytoma at first relapse. J. Clin. Oncol., 17: 2762 1999.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32164579/)
Friedman H. S., McLendon R. E., Kerby T., Dugan M., Bigner S. H., Henry A. J., Ashley D. M., Krischer J., Lovell S., Rasheed K., Marchev F., Seman A. J., Cokgor I., Rich J., Stewart E., Colvin O. M., Provenzale J. M., Bigner D. D., Haglund M. M., Friedman A. H., Modrich P. L. DNA mismatch repair and O⁶-alkylguanine-DNA alkyltransferase analysis and response to Temodal in newly diagnosed malignant glioma. J. Clin. Oncol., 16: 3851-3857, 1998.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9850030/)
Middleton M. R., Lunn J. M., Morris C., Rustin G., Wedge S. R., Brampton M. H., Lind M. J., Lee S. M., Newell D. R., Bleehen N. M., Newlands E. S., Calvert A. H., Margison G. P., Thatcher N. O⁶-methylguanine-DNA methyltransferase in pretreatment tumour biopsies as a predictor of response to temozolomide in melanoma. Br. J. Cancer, 78: 1199-1202, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9820180/)
Middleton M. R., Grob J. J., Aaronson N., Fierlbeck G., Tilgen W., Seiter S., Gore M., Aamdal S., Cebon J., Coates A., Dreno B., Henz M., Schadendorf D., Kapp A., Weiss J., Fraass U., Statkevich P., Muller M., Thatcher N. Randomized Phase III study of temozolomide versus dacarbazine in the treatment of patients with advanced metastatic malignant melanoma. J. Clin. Oncol., 18:158-166, 2000.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15829494/)
Piccioni D., D’Atri S., Papa G., Caravita T., Franchi A., Bonmassar E., Graziani G. Cisplatin increases sensitivity of human leukemic blasts to triazene compounds. J. Chemother., 7: 224-229, 1995.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/7562019/)
Britten C. D., Rowinsky E. K., Baker S. D., Agarwala S. S., Eckardt J. R., Barrington R., Diab S. G., Hammond L. A., Johnson T., Villalona-Calero M., Fraass U., Statkevich P., Von Hoff D. D., Eckhardt S. G. A Phase I and pharmacokinetic study of temozolomide and cisplatin in patients with advanced solid malignancies. Clin. Cancer Res., 5: 1629-1637, 1999.(доступно тут: https://clincancerres.aacrjournals.org/content/clincanres/5/7/1629.full.pdf)
Hammond L., Eckardt J., Kuhn J., Rizzo J., Johnson T., Villalona-Calero M., Smith L., Drengler R., Campbell L., Von Hoff D., Rowinsky E. Phase I and pharmacokinetic (PK) trial of sequences of BCNU and temozolomide (TMZ) in patients with solid neoplasms. Ann. Oncol., 9(Suppl.2): 441 1998.

(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31724813/)
Kirkwood J. M., Agarwala S. S., Diaz B., Donnelly S., Statkevich P., Dugan M. Phase I study of temozolomide in combination with interferon α-2b in metastatic malignant melanoma. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 16:491 1997.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/18337651/)
McVie J. G. The therapeutic challenge of gliomas. Eur. J. Cancer, 29A: 936-939, 1993.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/8499145/)
Agarwala S. S., Kirkwood J. M. Adjuvant therapy of melanoma. Semin. Surg. Oncol., 14: 302-310, 1998.(https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/9588723/)